Aspirasi sumsum tulang membantu dalam rawatan luka tanpa luka.

Percubaan klinikal mengenai keberkesanan aspirat sumsum tulang sebagai satu cara untuk rawatan luka-luka yang tidak menyembuhkan luka telah dijalankan. Melakukan kelulusan kaedah rawatan ini, saintis bergantung pada kesan imunomodulator, rangsangan regenerasi tisu dan hematopoiesis.

Aspirasi diperolehi dengan mencantumkan sumsum tulang dari ileum pesakit dan digunakan secara langsung ke permukaan luka. Hasil menggalakkan diperolehi: pada minggu itu permukaan luka telah dikurangkan lebih daripada 50%, rangsangan epithelisasi dan vascularization diperhatikan, luka telah dibersihkan daripada unsur-unsur nekrotik, yang penting untuk penyembuhan luka. Para penulis mencatat bahawa teknik ini mempunyai masa depan yang hebat, tetapi ujian klinikal tambahan diperlukan pada kontinjen penting pesakit.

Aspirasi sumsum tulang membantu dalam rawatan luka tanpa luka.

Percubaan klinikal mengenai keberkesanan aspirat sumsum tulang sebagai satu cara untuk rawatan luka-luka yang tidak menyembuhkan luka telah dijalankan. Melakukan kelulusan kaedah rawatan ini, saintis bergantung pada kesan imunomodulator, rangsangan regenerasi tisu dan hematopoiesis.

Aspirasi diperolehi dengan mencantumkan sumsum tulang dari ileum pesakit dan digunakan secara langsung ke permukaan luka. Hasil menggalakkan diperolehi: pada minggu itu permukaan luka telah dikurangkan lebih daripada 50%, rangsangan epithelisasi dan vascularization diperhatikan, luka telah dibersihkan daripada unsur-unsur nekrotik, yang penting untuk penyembuhan luka. Para penulis mencatat bahawa teknik ini mempunyai masa depan yang hebat, tetapi ujian klinikal tambahan diperlukan pada kontinjen penting pesakit.

Aspirasi sumsum tulang

Apakah aspirasi sumsum tulang?

Aspirasi sumsum tulang adalah prosedur yang melibatkan mengambil sampel dari tisu lembut di dalam tulang anda. Sumsum tulang adalah tisu spongy yang terdapat di dalam tulang. Ia mengandungi sel yang menghasilkan sel darah putih, sel darah merah dan platelet dalam tulang yang lebih besar, seperti:

Leukosit membantu melawan jangkitan. Erythrocytes membawa oksigen dan nutrien. Platelet boleh menebal darah.

Jika kiraan darah lengkap menunjukkan bahawa bilangan atau fungsi sel darah merah, leukosit, atau platelet tidak normal atau rendah, doktor anda mungkin ingin memeriksa sumsum tulang anda untuk membantu menentukan punca. Aspirasi sumsum tulang sering dilakukan dengan biopsi sumsum tulang yang menggunakan jenis jarum yang berbeza untuk mengeluarkan tisu dari sumsum tulang anda.

Kenapa aspirasi sumsum tulang dilakukan?

Banyak keadaan dikaitkan dengan sumsum tulang yang tidak sihat. Sekiranya ujian darah awal anda menunjukkan paras rendah darah putih atau merah atau platelet, doktor anda boleh memerintahkan aspirasi sumsum tulang. Ujian ini digunakan untuk memeriksa penyakit, serta memantau perkembangan atau rawatan penyakit tertentu.

Keadaan dan penyakit yang berkaitan dengan masalah sum-sum tulang termasuklah:

  • anemia, iaitu bilangan sel darah merah
  • penyakit sum-sum tulang, seperti myelofibrosis atau sindrom myelodysplastic
  • sel-sel darah seperti leukopenia atau polycythemia
  • kanser sum-sum tulang atau darah seperti leukemia hemochromatosis atau limfoma
  • , yang merupakan penyakit genetik di mana zat besi terbentuk dalam darah
  • , terutamanya penyakit kronik seperti tuberkulosis
  • penyakit penyimpanan seperti amyloidosis atau penyakit Gaucher

Aspirasi sumsum tulang juga boleh menjadi ujian penting jika anda mempunyai rawatan kanser. Ini dapat membantu menentukan jika kanser telah merebak ke tulang.

Apakah risiko yang dikaitkan dengan aspirasi sumsum tulang?

Peperiksaan sumsum tulang selamat, tetapi semua prosedur perubatan membawa beberapa jenis risiko. Dalam kes yang jarang berlaku, komplikasi berikut adalah mungkin:

  • tindak balas alahan terhadap anestesia
  • pendarahan yang berlebihan
  • jangkitan
  • ketidakselesaan jangka panjang

Risiko jarang berlaku dan paling sering dikaitkan dengan keadaan yang menyebabkan sistem imun yang lemah atau kiraan platelet rendah. Sistem imun yang lemah dapat membuat anda lebih terdedah kepada jangkitan, dan kiraan platelet rendah meningkatkan risiko pendarahan yang berlebihan.

Bagaimana untuk mempersiapkan aspirasi sumsum tulang

Anda mesti memberitahu doktor mengenai ubat-ubatan yang mungkin anda ambil, termasuk ubat-ubatan yang berlebihan (over-the-counter) atau suplemen pemakanan. Anda juga harus memberitahu mereka tentang alahan yang ada. Doktor anda boleh meminta anda berhenti mengambil ubat-ubatan tertentu sebelum prosedur. Tetapi anda tidak boleh berhenti mengambil apa-apa ubat kecuali doktor anda memberi anda ini.

Beritahu doktor anda jika anda gugup mengenai prosedur. Mereka boleh memberi anda sedative ringan yang akan membantu anda menjalani prosedur.

Ikut arahan doktor sebelum prosedur.

Bagaimana aspirasi sumsum tulang dilakukan

Anda akan diminta menukar pakaian hospital dan berbaring di sebelah atau perut anda. Tubuh anda akan ditutup dengan kain, supaya hanya kawasan kajian akan kelihatan.

Doktor anda akan memeriksa kadar denyutan jantung dan tekanan darah anda sebelum aspirasi sumsum tulang.

Sebelum prosedur ini, anda akan diberikan anestesia tempatan untuk menangkis kawasan di mana aspirasi akan berlaku. Ini biasanya di bahagian atas belakang sendi pinggul. Kadang-kadang ia boleh diambil dari brisket.

Doktor anda akan membuat potongan kecil yang akan memudahkan jarum berongga untuk menembusi kulit anda. Jarum itu kemudian memasuki tulang. Doktor anda menggunakan picagari di belakang jarum untuk mengeluarkan bahagian cecair sumsum tulang.

Sejurus selepas prosedur itu, hirisan akan dibalut dan anda akan pergi ke bilik lain untuk berehat sebelum anda pulang ke rumah.

Selepas aspirasi sumsum tulang

Anda mungkin merasa sakit sedikit kira-kira seminggu selepas prosedur. Anda biasanya boleh menguruskannya dengan pembunuh rasa sakit OTC. Anda juga perlu menjaga kecederaan luka. Anda mesti menjaga luka kering selama 24 jam selepas prosedur.

Semasa anda mengurus luka anda, sampel sumsum tulang anda dihantar ke makmal untuk ujian. Doktor anda akan mengkaji semula keputusan ujian dengan anda semasa mesyuarat susulan.

Pemeriksaan mikroskopik aspirat sumsum tulang untuk penyakit malignan hematopoiesis - perbandingan dua kaedah untuk menyediakan slaid

Pemeriksaan mikroskopik aspirat sumsum tulang diperlukan semasa diagnosis banyak gangguan hematopoietik neoplastik. Pada tahun 2008, Jawatankuasa Antarabangsa untuk Penyeragaman Hematologi mengesyorkan menggunakan dua jenis slaid untuk penilaian mikroskopik sumsum tulang: filem berbentuk baji dan slaid untuk menghancurkan filem. Oleh kerana kaedah ini belum dibandingkan, kami membuat perbandingan seperti itu. Sampel tulang sumsum normal dari 250 pesakit yang didiagnosis akibat pelbagai neoplastic hematological disorders dinilai. Perbezaan utama antara kedua-dua kaedah tersebut didapati dalam 13 pesakit dengan limfoma bukan Hodgkin, tujuh pesakit dengan mastositosis sistemik dan 11 pesakit dengan leukemia akut atau sindrom myelodysplastic atau dengan leukemia myelomonositik kronik. Perbezaan juga diperhatikan di banyak pesakit dengan pelbagai myeloma, tetapi kepentingan klinikal dari perbezaan ini agak sederhana. Alasan utama untuk perbezaan yang diperhatikan, nampaknya, adalah pencairan sumsum tulang dengan darah dan pertumbuhan fokus banyak sel-sel neoplastik. Kami percaya bahawa teknik menghancurkan lebih menguntungkan berbanding filem yang mempunyai sambungan baji. Oleh itu, kami mengesyorkan menggunakan filem menghancurkan sebagai kaedah utama untuk menubuhkan diagnosis atau membuat keputusan terapeutik berdasarkan pemeriksaan mikroskopik sum-sum tulang.

Pemeriksaan mikroskop pada sumsum tulang merupakan salah satu prosedur diagnostik utama dalam hematologi. Menurut cadangan terbaru yang berkaitan dengan diagnosis neoplasma ganas sistem sumsum tulang dan limfa Pertubuhan Kesihatan Sedunia (WHO), kepentingan pemeriksaan mikroskopik sum-sum tulang tidak berkurang; Sebaliknya, kriteria morfologi yang lebih tepat ditentukan, apabila perlu, untuk mengelakkan kekaburan.

Untuk banyak penyakit, penanda yang lebih spesifik atau penanda molekul didapati, berbanding dengan pemeriksaan mikroskopik, membolehkan penilaian yang lebih tepat mengenai bilangan sel-sel atipikal. Walau bagaimanapun, penanda itu tidak tersedia untuk semua penyakit, dan peperiksaan mikroskopik kekal sebagai satu-satunya atau kaedah utama diagnosis dan pemantauan terapi yang dijalankan. Di samping itu, bagi penyakit di mana diagnosis berdasarkan kaedah genetik atau immunophenotyping, pemeriksaan mikroskopik berkala untuk sumsum tulang diperlukan untuk memeriksa dengan cepat pelbagai manifestasi dari keadaan transformasi atau perubahan tidak berganda sekunder. Klasifikasi WHO menetapkan jangkaan yang sangat tinggi untuk ahli sitologi, kerana diagnosis akhir sering didasarkan pada perkiraan yang dianggarkan peratusan komposisi sel tulang sumsum yang betul. Dalam amalan klinikal kami, penilaian aspirasi sumsum tulang dalam pesakit yang sama, dilakukan di makmal yang berlainan, menghasilkan keputusan yang berbeza, walaupun setiap penilaian dijalankan dengan sewajarnya. Perbezaan ini disebabkan terutamanya oleh adanya dua kaedah penyediaan slaid. Jawatankuasa Standardisasi Hematologi Antarabangsa (ICSH) mengesyorkan menggunakan dua jenis slaid untuk penilaian mikroskopik sumsum tulang: filem berbentuk baji (teknik 1) dan filem jerami (teknik 2) slaid [1]. Kaedah-kaedah yang disebutkan di atas masih belum dibandingkan dari segi kaitan untuk diagnosis dan pemantauan pada pesakit dengan gangguan hematologi. Tujuan kajian ini adalah untuk membandingkan kaedah penyebaran baji dan filem menghancurkan dan menentukan mana yang lebih sesuai untuk mendiagnosis dan / atau memantau kumpulan penyakit hematologi tertentu.

Sampel sumsum tulang dikumpulkan dari 250 pesakit yang didiagnosis dan dirawat di Jabatan Hematologi dan Transplantologi di Universiti Perubatan Gdansk. Aspirasi sumsum tulang diambil dari tulang belakang ileal posterior mengikut cadangan ICSH [1]. Hanya aspirasi sumsum tulang yang mengandungi zarah yang dianalisis. Smear dari setiap sampel sumsum tulang telah disediakan menggunakan kedua-dua teknik oleh pakar yang sama tidak lebih daripada 20 minit selepas aspirasi. Dalam teknik 1, sampel telah dicampakkan ke atas slaid kaca menggunakan pinggir kaca lain, manakala dalam teknik 2, zarah-zarah tersebut dimampatkan di antara dua slaid kaca. Selepas pewarnaan dengan kaedah May-Grunwald-Giems, slaid tertakluk kepada peperiksaan mikroskopik mengikut garis panduan ICSH [1]. Dalam slaid yang diperolehi mengikut kaedah 1, bilangan pembezaan sel embrionik dilakukan di kawasan dengan serta-merta di hadapan zarah sumsum tulang. Dalam slaid yang diperoleh dengan kaedah 2, hanya sel sum-sum tulang yang diedarkan dengan baik dianalisis di sekitar zarah sumsum tulang. Kawasan yang mempunyai sejumlah besar sel yang rosak telah dikecualikan. Ketumpatan sel sum-sum tulang diperhatikan dengan peningkatan × 100 dan × 400 dan digambarkan sebagai: aplastic, sangat rendah, rendah, sederhana, tinggi, atau meningkat. Peningkatan yang sama digunakan untuk menganggarkan jumlah megakaryosit yang diterangkan di bawah: ketiadaan megakaryosit, jumlah megakaryosit yang sangat kecil, bilangan megakaryosit yang rendah, sederhana, tinggi atau sangat tinggi. Kemudian di kawasan terpilih dijalankan mengira sel-sel pembezaan dengan nombor nukleotida (angka 1). Sekurang-kurangnya 1000 sel dikira. Sel telah dikenal pasti mengikut piawaian yang diterima umum [2-4]. Evaluasi kuantitatif bagi sel-sel individu telah dilakukan dengan peningkatan × 500 dan × 1000. Menurut cadangan WHO, perubahan disisikkali dinilai secara kualitatif dalam 200 sel-sel erythropoiesis dan granulopoiesis dan dalam 30 megakaryosit (jika mungkin) [5]. Bagi setiap pesakit, slaid yang disediakan menggunakan kedua-dua teknik itu telah dibandingkan dan dinilai, dan dalam setiap kes percubaan dibuat untuk menganalisis sebab-sebab untuk sebarang perbezaan potensi. Untuk mengelakkan sebarang kecenderungan yang berkaitan dengan penilaian yang dilakukan oleh pengendali yang berlainan, semua peperiksaan mikroskopik dilakukan secara membuta tuli oleh orang yang sama. 1 smear sumsum tulang disediakan menggunakan teknik 1 (a) dan 2 (b) dengan pembesaran × 100 (bahagian atas setiap imej) dan pembesaran × 400 (bawah setiap imej)

Pengagihan kebanyakan pembolehubah adalah tidak normal (ujian Kolmogorov-Smirnov, p 5%, menunjukkan kekurangan penularan sitologi, didiagnosis pada 12 pesakit apabila slaid yang disediakan menggunakan kaedah 2 dinilai, dan hanya tujuh pesakit untuk slaid yang disediakan menggunakan 1. Walaupun terdapat kekurangan peningkatan dalam sel-sel letupan dalam slaid yang diperolehi menggunakan teknik 1, peningkatan yang ketara ditunjukkan pada teknik 2 dalam slaid lima pesakit. Nilai angka ditunjukkan dalam Jadual 5. Jadual 5 Secara klinikal, perbezaan peratusan sel domain dalam aspirin sumsum tulang yang dikumpulkan dari pesakit dengan terapi terapi AL

Pemeriksaan mikroskopik sumsum tulang untuk masa yang lama kekal sebagai salah satu prosedur diagnostik yang paling penting dalam hematologi. Oleh itu, sangat penting untuk mengetahui bahawa semasa peperiksaan, ciri-ciri diagnostik pelbagai penyakit dapat dikesan, bergantung kepada kaedah persediaan slaid yang digunakan. Walaupun kita menunjukkan beberapa perbezaan yang kelihatannya bergantung kepada teknik persediaan slaid yang digunakan dalam semua kumpulan penyakit hematopoietik neoplastik, tidak semua mereka secara klinikal penting. Sebagai contoh, tanpa mengira teknik yang digunakan, penyusupan limfositik adalah diagnostik untuk B-CLL. Walau bagaimanapun, dalam kebanyakan kumpulan gangguan yang lain, nilai kritikal mempunyai perbezaan antara hasil yang dinyatakan dengan pemeriksaan mikroskopik, bergantung kepada kaedah yang digunakan.

Penilaian infiltrasi limfosit pada limfoma bukan Hodgkin selalu sukar untuk pemeriksaan mikroskopik sumsum tulang sekurang-kurangnya dua sebab. Pertama, penyusupan sumsum tulang sering menjadi tumpuan; Kedua, beberapa sel limfoma yang berasal dari sistem limfatik periferal dapat bergerak ke sumsum tulang dengan darah, kadang-kadang menyarankan infiltrasi sampai batas tertentu. Perbandingan menunjukkan bahawa kaedah 2 lebih berguna untuk menilai penyusupan sumsum tulang oleh proses limfoproliferatif, terutamanya ciri-ciri fokal, yang selaras dengan cadangan yang diterbitkan [1]. Kesimpulan dari slaid yang diperoleh menggunakan kaedah ini berkorelasi lebih baik dengan hasil kajian biopsi trephin. Teknik 2 menyebabkan beberapa masalah dengan tafsiran, terutamanya apabila agregat limfositik yang benih terdapat di sumsum tulang, yang boleh muncul dalam sumsum tulang biasa dan di sumsum tulang yang terjejas oleh proses keradangan. Agregat sedemikian boleh berbeza-beza mengikut saiz, dibezakan dengan baik dari sel-sel hematopoietik dan terutamanya terdiri daripada beberapa limfosit matang dengan beberapa sel limfoid, histiocytes, sel-sel plasma dan makrofag yang terletak di antara limfosit. Kekerapan agregat limfoid hadir dalam aspirin sumsum tulang biasanya tidak melebihi 20%; bagaimanapun, ujian autopsi menunjukkan mereka dalam 62% biopsi [6, 7]. Komposisi sel-sel seperti agregat sel-sel limfoid sering boleh menunjukkan sifat mereka. Peratusan yang tinggi kurang daripada bentuk limfoid polimorfik, bukan limfosit matang, mungkin menunjukkan penyusupan malignan. Sitometri aliran sering disebut sebagai kaedah untuk memeriksa asal klonal agregat tersebut [6]. Walau bagaimanapun, hasil negatif penyelidikan sitometri aliran tidak mengecualikan fakta bahawa agregat limfoid neoplastik mungkin masih terdapat di sumsum tulang. Oleh kerana alasan yang disebutkan di atas, kaedah pemeriksaan yang paling objektif untuk mengesahkan penyusupan limfoproliferatif fokal dalam sumsum tulang adalah biopsi trephine [8].

Sejak beberapa tahun yang lalu, kriteria diagnostik untuk pelbagai myeloma telah berubah dengan ketara, dan pada masa ini, peratusan sel plasma dalam sumsum tulang tidak dianggap tegas untuk mengesahkan diagnosis. Bilangan sel plasma ≥30% dan 10-29%, yang ditetapkan sebagai kriteria myeloma "asas" dan "kecil" (mengikut klasifikasi WHO sebelumnya), tidak lagi digunakan. Dianggarkan bahawa peratusan sel plasma yang disahkan semasa diagnosis pertama di kebanyakan pesakit adalah ≥10%. Keadaan ini tidak memegang kira-kira 10% pesakit dengan pelbagai myeloma (MM) [9]. Dalam kajian ini, kita menunjukkan bahawa perbezaan peratusan sel plasma adalah sangat tinggi bergantung kepada kaedah penyediaan slaid yang digunakan berkaitan dengan sifat pertumbuhan agregat sel plasma dalam sumsum tulang. Oleh itu, kajian rutin terhadap patologi dan penggunaan teknologi 2 untuk kajian mikroskopik sepenuhnya dibenarkan. Pada masa ini, untuk mengesahkan diagnosis MM, adalah perlu untuk menunjukkan bahawa klon sel plasma hadir dalam sumsum tulang, yang memerlukan kaedah lain seperti cytometry aliran. Walau bagaimanapun, aliran sitometri tidak boleh dianggap sebagai pengganti pemeriksaan mikroskopik [10]. Penulis menunjukkan bahawa, walaupun penilaian sitometrik aliran mengesahkan kehadiran klon sel plasma dalam sumsum tulang, peratusan sel plasma jauh lebih rendah daripada dalam kajian morfologi, selalunya tidak melebihi 5%. Oleh itu, nampaknya tidak wajar untuk mengesyorkan cytometry aliran untuk menilai sejauh mana penyusupan sel plasma, yang seharusnya ditaksir menggunakan kajian patologi atau penilaian mikroskopik menggunakan slaid yang diperolehi menggunakan teknik 2.

Sel-sel lemak yang merupakan sebahagian daripada stroma sumsum tulang adalah sebahagian daripada zarah sumsum tulang. Oleh itu, sel-sel ini jarang dilihat pada jarak dari zarah, dan jika terdapat beberapa sel mast mast dalam slaid yang disediakan mengikut kaedah 1, ini mungkin menunjukkan bahawa bilangan sel mast sebenar dalam sumsum tulang sebenarnya lebih tinggi. Walau bagaimanapun, kenaikan ini tidak memberi sebarang maklumat tentang sebab kenaikan ini dalam bilangan sel mast, yang mungkin dikaitkan dengan proses keradangan reaktif. Agregat sel mast adalah setempat dalam zarah sumsum tulang dengan kuat menunjukkan proses proliferatif [11]. Agregat sedemikian diperhatikan pada kebanyakan slaid yang diperoleh menggunakan teknik 2, yang diperoleh daripada pesakit dengan diagnosis SM yang akhirnya disahkan. Di dalam slaid yang disediakan menggunakan teknik 1, adalah mustahil untuk mengenali agregat sedemikian dalam zarah sumsum tulang yang tidak tercemar. Dengan hanya beberapa tiang sel yang ada, mungkin tidak dapat menentukan peratusan bentuk atipikal dengan tepat, yang merupakan salah satu kriteria untuk mendiagnosis CM [12]. Itulah sebabnya pemeriksaan mikroskopik untuk SM perlu dilakukan menggunakan slaid yang disediakan mengikut kaedah 2. Dalam slaid yang disediakan menggunakan teknik 1, gambaran sumsum tulang secara umumnya tidak jelas dan samar-samar, dan perubahan ciri-ciri SM diperhatikan hanya apabila penyusupan yang ketara telah hadir. Walau bagaimanapun, perlu ditekankan bahawa biopsi trephin tetap diperlukan untuk setiap pesakit yang disyaki mastositosis sistemik.

Pemeriksaan mikroskop pada sumsum tulang adalah penting untuk diagnosis AL, MDS dan CMML. Klasifikasi Franco-Amerika-British yang sebelum ini telah memenuhi kanser ini hanya berdasarkan ciri-ciri sitologi dan sitokimia [13, 14]. Kriteria diagnostik telah bertambah baik dengan penambahan ujian imunophenotyping, cytogenetic dan molekul. Banyak data berharga menyediakan penilaian biopsi trephine, yang harus selalu dilakukan jika sindrom myelodysplastic disyaki. Walaupun demikian, penilaian mikroskopik masih penting untuk diskriminasi peratusan sel domain. Di samping itu, tiada kaedah yang lebih baik untuk menganggarkan jumlah letupan dalam sumsum tulang. Analisa aliran cytometry, berdasarkan pengiraan CD34 + sel, tidak dapat menggantikan pemeriksaan mikroskopik, kerana tidak setiap sel letupan mengungkapkan antigen CD34. Selain itu, analisis aliran sitometri sangat bergantung pada pencairan sumsum tulang oleh darah, serta pada fibrosis sumsum tulang [15]. Batasan di atas boleh menyebabkan peratusan rendah sel domain. Klasifikasi MDS yang digunakan sekarang bukan sahaja mengesahkan kehadiran displasia yang meningkat, tetapi juga pada jumlah sel-sel letupan dalam darah dan sumsum tulang. Parameter terakhir ini mempunyai nilai ramalan yang ketara dan dimasukkan ke dalam tiga parameter yang diperlukan untuk penciptaan Sistem Peramalan Antarabangsa, yang pada gilirannya digunakan untuk membuat keputusan terapeutik [16]. Telah didapati bahawa teknik persembahan slaid sama-sama sensitif terhadap pengesanan anomali displastis. Teknik 2 adalah berfaedah dari segi menilai garis platelet: bilangan megakaryosit biasanya lebih tinggi, dan butiran dalam bentuk nukleus lebih mudah dilihat. Walau bagaimanapun, jika ciri kualitatif displasia adalah lemah, dan bilangan letupan adalah anomali yang dominan, penggunaan kaedah 1 boleh membawa kepada hasil negatif palsu dan tidak akan membenarkan mengesahkan diagnosis MDS. Perbezaan dalam jumlah sel domain dalam MDS, nampaknya tidak hanya dikaitkan dengan pencairan sumsum tulang dengan darah periferal, tetapi juga dengan fakta bahawa sel-sel letupan boleh digabungkan menjadi kelompok dalam zarah sumsum tulang. Zarah-zarah ini jelas kelihatan dalam kajian biopsi trefin, biasanya dalam bentuk MDS yang lebih maju [15]. Oleh itu, kami percaya bahawa teknik 2 lebih dipercayai untuk mendiagnosis MDS dan berkorelasi dengan gambaran klinikal pesakit.

Perbezaan penting secara klinikal dalam kedua-dua kaedah penyediaan sumsum tulang sering dikaitkan dengan leukemia akut yang berkaitan dengan myelodysplasia bertingkat atau dengan leukemias sekunder. Sering kali, sindrom myelodysplastic, seperti yang ditunjukkan dalam slaid yang diperoleh menggunakan teknik 1, diiktiraf sebagai leukemia akut dalam slaid yang diperolehi mengikut kaedah 2. Mengambil kira kemungkinan pertumbuhan fokus sel domain, untuk mewujudkan subtipe hiperplasia sumsum tulang (MDS atau AML) adalah dinasihatkan untuk menggunakan peratusan tertinggi sel-sel letupan dari slaid yang diperoleh menggunakan teknik 1 atau teknik 2. Pendekatan ini akan memenuhi kriteria untuk mengenali krisis sel-sel domain dalam kronik leukemia myeloid [17].

Memantau kesan kemoterapi pada leukemia akut mungkin memerlukan kaedah diagnostik yang paling tepat, yang terutama berdasarkan kepada imunologi dan / atau kaedah molekul. Pemeriksaan mikroskopik telah hilang makna, kerana ia biasanya tidak memberikan ketepatan yang diperlukan oleh banyak rejimen terapeutik moden. Dalam kajian kami, kami menunjukkan bahawa penilaian tulang sumsum menggunakan teknik 1 menunjukkan remisi, sedangkan kajian yang dilakukan dalam slaid yang disediakan menggunakan kaedah 2 dikecualikan remisi. Kajian cytometry aliran harus menunjukkan jumlah letupan yang serupa dengan petunjuk yang diperoleh menggunakan teknik 1. Perlu diingat bahawa apabila membuat keputusan terapeutik, aliran cytometry biasanya cenderung untuk mengesan sel yang lebih rendah dari sel domain daripada mungkin sebenarnya.

Keputusan yang dikemukakan mengesahkan bahawa pemeriksaan mikroskopik sumsum tulang pada pesakit dengan salah satu daripada beberapa gangguan neoplastik hematopoietik boleh menghasilkan keputusan yang berbeza bergantung kepada kaedah yang digunakan untuk menyediakan slaid. Banyak gejala penting yang mudah dilihat di dalam slaid yang disediakan menggunakan teknik 2 (contohnya, penyusupan limfosit fokal atau sel mast) tidak dapat dilihat dalam slaid yang diperoleh menggunakan teknik 1. Sebaliknya, dalam beberapa situasi tertentu (contohnya, sel-sel limfatik fleecy), kaedah 1 boleh memelihara morfologi sel tunggal. Oleh itu, kami menyokong sepenuhnya garis panduan ICSH, yang menyatakan bahawa pemeriksaan mikroskopik perlu dijalankan menggunakan slaid yang disediakan menggunakan mana-mana teknik ini. Kami percaya bahawa teknik 2 adalah lebih berfaedah berbanding dengan teknik 1. Di samping itu, keputusan yang diperoleh menggunakan slaid yang diperoleh menggunakan kaedah 2 menghubungkan lebih baik dengan keputusan gambar klinikal dan kajian biopsi trephin. Oleh itu, kami cadangkan menggunakan Kaedah 2 sebagai kaedah utama untuk membuat diagnosis atau membuat keputusan terapeutik berdasarkan pemeriksaan mikroskopik pada sumsum tulang.

Konflik Kepentingan Penulis tidak mengisytiharkan percanggahan kepentingan.

Akses Terbuka Artikel ini diedarkan di bawah lesen Pengiktirafan Creative Commons bukan komersil, yang membenarkan sebarang penggunaan, pengedaran dan pembiakan bukan komersil pada mana-mana medium, dengan syarat bahawa asal dan sumbernya dikreditkan.

Apakah punca sumsum tulang yang diambil dan apakah analisis yang ditunjukkan?

Tumpukan sumsum tulang adalah satu kaedah diagnostik yang digunakan untuk memantau atau mengenal pasti penyakit yang mempengaruhi sistem darah dan hematopoietik. Tusukan juga digunakan untuk mengesahkan atau mengesahkan anemia, leukemia dan penyakit hematologi lain. Kajian sumsum tulang diberikan berdasarkan pemeriksaan fizikal dan sejarah pesakit. Dalam artikel ini kita akan mengkaji apa itu - punca tulang sumsum.

Apakah punca sumsum tulang?

Sebelum melakukan prosedur, pundi kencing dan usus perlu dikosongkan, dan pemeriksaan diagnostik atau prosedur pembedahan lain tidak disyorkan pada hari tusuk.

Sumsum tulang terdiri daripada sel stem, yang merupakan sel yang tidak dapat dibezakan. Terdapat dua jenis utama sel induk, dan oleh itu sumsum tulang terdiri daripada dua jenis tisu sel. Satu jenis yang terlibat dalam pengeluaran sel darah, dan yang lain dalam pengeluaran sel stromal.

Aspirasi sumsum tulang terutamanya digunakan untuk menilai morfologi dan memperoleh kiraan sel perbezaan. Bahan yang diperoleh semasa aspirasi boleh dipelajari oleh kaedah sitogenetik, molekul, mikrobiologi, imunohistokimia dan sitometrik.

Pemeriksaan biopsi dan pemeriksaan histologi seterusnya membolehkan untuk menilai selular keseluruhan sum-sum tulang, untuk mengenal pasti luka-luka focal dan untuk menentukan tahap penyusupan oleh pelbagai mikroorganisma patologi.

Pesakit berminat: di manakah sumsum tulang berasal? Semasa tusuk, sumsum tulang dikeluarkan dengan jarum khas dari tulang panggul atau sternum. Pelbagai peringkat kematangan sel darah boleh dikesan di makmal. Dengan bantuan myelogram adalah mungkin untuk mengenal pasti penyakit darah atau sistem hematopoietik.

Sampel sumsum tulang boleh didapati melalui aspirasi atau biopsi. Sampel yang diperolehi oleh kaedah aspirasi adalah semi-cecair, oleh itu ia boleh diperiksa oleh ahli patologi di bawah mikroskop cahaya dan dianalisis oleh cytometry aliran, analisis cytogenetic, chromosomal dan reaksi rantai polimerase (PCR).

Trepanobiopsy adalah sejenis biopsi tusuk di mana tisu sumsum tulang pepejal diambil. Sampel boleh digunakan untuk analisis imunohistokimia. Trepanobiopsi sumsum tulang paling kerap digunakan untuk menjelaskan diagnosis utama.

Petunjuk

Tusukan sumsum tulang dilakukan jika doktor mempunyai kecurigaan penyakit darah dan penyakit sistem hematopoietik.

  • Diagnosis atau pemantauan anemia, leukemia, aplasia sumsum tulang;
  • Diagnosis metastasis sumsum tulang (penyebaran tumor dari organ lain);
  • Mendapatkan sel-sel stem untuk transplantasi.

Leukemia adalah penyakit tulang sumsum yang paling biasa. Istilah "leukemia" merangkumi pelbagai penyakit ganas, yang semuanya serupa di mana ia berasal dari prekursor limfosit. Sel-sel yang diubahsuai secara beransur-ansur merebak di seluruh sumsum tulang merah, sekali gus menjejaskan pembentukan darah yang normal. Mereka juga memasuki aliran darah, dari mana mereka menyerang kelenjar getah bening, limpa, hati dan organ-organ dalaman yang lain. Di samping itu, kekurangan sel darah berfungsi menyebabkan anemia pada pesakit.

Contraindications

Apabila bentuk decompensated diabetes mellitus punca sumsum tulang tidak digalakkan.

Terdapat beberapa kontraindikasi untuk pemeriksaan sumsum tulang. Satu-satunya sebab mutlak yang mana pemeriksaan tidak dapat dilakukan adalah kehadiran pendarahan yang serius, kerana pendarahan mungkin berlaku selepas prosedur.

Jika jangkitan serius telah berkembang di sendi pinggul, tapak lain harus dipilih untuk pemeriksaan. Aspirasi sumsum tulang dan biopsi boleh dilakukan tanpa risiko walaupun dengan trombositopenia yang melampau (kiraan platelet rendah).

Komplikasi yang mungkin

Tusukan yang tajam boleh menyebabkan kesakitan yang teruk. Kesakitan yang pendek dan tajam itu cepat berhenti; ia juga boleh dikurangkan dengan ubat penahan sakit yang sesuai. Di samping itu, dalam kes yang jarang berlaku, punca sumsum tulang boleh menyebabkan komplikasi berikut:

  • Perdarahan dan jangkitan di tapak tusuk;
  • Trauma dan keradangan organ-organ yang bersebelahan dan struktur tisu;
  • Gangguan pernafasan atau kardiovaskular dengan pengenalan penenang atau analgesik.

Dengan tusukan - seperti dengan pemeriksaan dan prosedur rawatan lain - komplikasi yang mungkin tidak diingini boleh berlaku. Ramai pesakit mungkin mengambil berat tentang kesakitan teruk akibat tusuk. Walau bagaimanapun, akibat daripada penyakit yang tidak dapat dijelaskan boleh menjadi lebih serius daripada kesakitan dari prosedur.

Kesan buruk lain termasuk:

  • Hematomas dan abses;
  • Sepsis (keracunan darah);
  • Tebukan dan kecederaan (organ bersebelahan, saraf, saluran darah).

Sum-sum tulang boleh dibubarkan pada pesakit luar atau pesakit luar (di Jabatan Perubatan Dalaman, Hematologi, Onkologi). Bergantung pada keadaan, perundingan atau arahan doktor yang diperlukan.

Kemajuan prosedur

Paracetamol atau analgesik lain boleh diambil untuk melegakan kesakitan selama beberapa hari.

Tusukan aspirasi dilakukan terlebih dahulu. Jarum sedutan dimasukkan melalui kulit dengan tangan sehingga mencapai tulang. Kemudian, jarum itu akan maju melalui periosteum (lapisan luar tulang yang tegar) ke rongga otak. Sebaik sahaja jarum memasuki aspirat sumsum tulang, cecair diambil. Ini memerlukan ketepatan dalam pergerakan doktor semasa prosedur untuk mengelakkan kandungan darah tinggi dalam sampel.

Jika punca aspirasi tidak mencukupi, biopsi dilakukan di kawasan sum-sum tulang. Jarum besar digunakan, yang diletakkan dan diamankan dalam korteks tulang. Kemudian jarum dimasukkan dalam gerakan memutar dan bertukar untuk mendapatkan sekeping tulang sumsum padat. Sampel yang dihasilkan dikeluarkan dari pesakit bersama dengan jarum. Tempoh prosedur boleh dari 10 hingga 15 minit.

Sekiranya perubahan ganas dalam sumsum tulang disyaki, biopsi punch juga boleh dilakukan. Di makmal, tisu yang dikeluarkan dapat dipotong, diwarnai dan diperiksa di bawah mikroskop. Selalunya, biopsi punch dilakukan pada kanak-kanak.

Setelah menyelesaikan prosedur, pesakit biasanya diminta berbaring selama 5-10 minit. Selepas itu, jika tidak ada pendarahan, pesakit boleh berdiri dan kembali ke aktiviti harian mereka. Paracetamol atau analgesik mudah lain boleh diambil oleh pesakit untuk melegakan kesakitan selama 2-3 hari. Apa-apa kemusnahan kesakitan, kemerahan, demam, pendarahan, atau bengkak memerlukan nasihat perubatan. Pesakit dinasihatkan agar tidak membasuh kawasan yang dicucuk selama 24 jam untuk mengelakkan jangkitan.

Persediaan untuk kajian ini

Obat-obatan yang memberi kesan kepada aliran darah harus dihentikan satu minggu sebelum prosedur.

Tumpukan sumsum tulang adalah prosedur pesakit luar jangka pendek. Kadar jantung, tekanan darah dan nilai-nilai lain akan dipantau selama sejam oleh doktor anda. Jika pesakit menerima ubat penghilang rasa sakit atau penenang sebelum prosedur, dilarang memandu kereta selama sehari. Selalunya perlu berunding dengan doktor terlebih dahulu untuk mengelakkan kemungkinan akibat dari prosedur tersebut. Doktor akan memberitahu anda ubat-ubatan atau langkah-langkah yang tidak disyorkan sebelum prosedur. Kadang-kadang ia boleh menyakitkan semasa prosedur. Biasanya, kesakitan teruk seharusnya tidak hadir.

Sebelum tusuk, doktor meminta pesakit tentang penyakit dan ubat-ubatan yang sudah ada sebelum ini. Jika pesakit menggunakan ubat-ubatan yang nipis darah, anda mesti memaklumkan kepada doktor anda. Aspirin dan ubat-ubatan lain yang memberi kesan kepada aliran darah harus dihentikan seminggu sebelum prosedur.

Keputusan

Apakah yang ditunjukkan oleh sumsum tulang? Kajian tulang sumsum tulang digunakan untuk mengenal pasti banyak penyakit, termasuk: leukemia, myeloma berbilang, limfoma, anemia dan pancytopenia. Banyak maklumat mengenai darah boleh diperoleh melalui penyelidikan rutin - ujian darah umum atau biokimia. Walau bagaimanapun, untuk mengetahui asal-usul penyakit, kadang-kadang perlu untuk menyiasat sumber sel darah.

Semasa aspirasi, tidak semua sel darah sentiasa kelihatan; dalam sesetengah keadaan - contohnya, dalam limfoma - sel-sel agglutinat dalam trabeculae tulang, bukannya dalam sinusoid, jadi mereka tidak dikumpulkan atau tidak kelihatan dalam analisis tulang sumsum.

Harga di mana

Kos rata-rata sumsum sumsum tulang di Moscow dan wilayah Moscow adalah 500 Rubles Rusia. Myelogram - kajian mengenai tulang sumsum - kos kira-kira 2500 Rubles. Harga banyak kajian bergantung kepada klinik swasta atau hospital perbandaran tertentu. Oleh itu, adalah disyorkan untuk menentukan kos akhir langsung di pusat perubatan.

Kemungkinan moden diagnosis kerosakan sum-sum tulang di limfoma bukan Hodgkin pada bahan trepanobioptate

Pengarang: E.V. Chigrinova, A.I. Pavlovskaya GU RCRC mereka. N.N. Blokhina RAMS, Moscow

Penglibatan sumsum tulang (KM) dalam limfoma nehodkine periferal (NHL) adalah salah satu fasa tetap dalam kumpulan penyakit ini. Petunjuk utama untuk kajian CM dalam NHL boleh dirumuskan seperti berikut:

  • menubuhkan peringkat dalam diagnosis awal limfoma;
  • penilaian dinamik proses semasa rawatan;
  • penilaian kualiti remisi;
  • kawalan remisi lengkap;
  • penilaian selular KM.

Pencerobohan sumsum tulang NHL boleh ditubuhkan pada pelbagai peringkat diagnostik, dari mikroskopi cahaya ke ujian biologi molekul. Bagi semua jenis kajian, terdapat kedua-dua kriteria yang jelas untuk mengenal pasti populasi limfoid neoplastik dan batasan kemungkinan kemungkinan. Seperti yang diketahui, terdapat dua jenis utama bahan KM yang diselidiki - aspirat (suspensi sel asli) dan trepanobioptat (silinder osteomedullary). Aspirasi sumsum tulang adalah penggantungan sel, yang membolehkan memberikan ciri-ciri sitologi kuantitatif unsur-unsur hematopoiesis, dan juga untuk menyiasat immunophenotype mana-mana subpopulations selular normal dan patologi menggunakan aliran cytofluorimetry (PC). Tujuan trepanobiopsy adalah kajian morfologi kompleks, yang membolehkan, sebagai tambahan kepada hematopoietik yang betul, untuk mendapatkan maklumat mengenai keadaan tulang dan tisu stromal. Objektif penerbitan ini adalah percubaan dalam ekspresi yang dapat diakses dari intipati kaedah moden untuk mengkaji CM di tahap trepanobioptate.

Trepanobiopsy membolehkan anda menilai sepenuhnya struktur CM (kehadiran atau ketiadaan penyusupan limfoid di dalamnya, sifat penyebarannya di CM dan, khususnya, lokasi inframerah limfoid berkenaan dengan rasuk tulang berlamina), serta keadaan hematopoiesis pada amnya, nisbah lemak dan hematopoietik tisu selular yang kedua, untuk mencirikan stroma dari rasuk CM dan tulang, khususnya, pengedaran dan keterukan reticulin dan serat kolagen, aktiviti osteoblas dan osteoklas, lebar selang rongga, dsb. Dalam ketiadaan atau ketidakupayaan teknikal suatu lesi extramedullari lesi limfoma, tanpa adanya limfositosis patologi dalam aspirat KM, trepanobioptum KM mungkin menjadi satu-satunya sumber bahan diagnostik. Sebab-sebab yang membawa kepada ketiadaan sel-sel limfoma dalam aspirat termasuk bilangan sel yang sangat kecil dalam klon leukemik, keparahan perubahan sclerosis dalam fosfat limfoma, dan juga ungkapan sel-sel limfoma molekul adhesi (MA), yang mana satu, memberikan penyebaran hemopoietic tisu dan stroma KM, dan pada yang lain - menentukan kekuatan hubungan antara sel dan stroma sel [1]. Adhesin yang menyediakan interaksi intratisular itu termasuk tiga superfamili: imunoglobulin - ICAM-1, CD54, integrit -? L (CD11a / LFA-1a),? X (CD11c),? 4 (CD49d / VLA-4)? (CD29),? 2 (CD18),? 3; serta selectins - L-selectin (CD62L), P-selectin (CD62P). Sudah tentu, ini bukan senarai keseluruhan MA yang dapat menentukan jenis penyebaran NHL dengan tropisme organ yang khusus. Walau bagaimanapun, dalam kesusasteraan tahun-tahun kebelakangan ini, ungkapan jenis MA ini dikaitkan dengan penglibatan CM dan ciri-ciri arkitekik limfoma foci di dalamnya [2]. P.J. Lucio et al. [3] menggambarkan hubungan antara ekspresi CD11a, CD11c, CD18, CD29, CD44, CD49d, CD54, CD62L dengan varian nosologi NHL dan agresif kursus. Salah satu penemuan yang menarik dalam karya mereka adalah andaian bahawa adalah mungkin untuk mengklasifikasikan NHL secara umum, serta subtipe individu dalam setiap nosologi, mengikut profil imunologi ekspresi MA. E. Horst et al. [4] memberikan penilaian perbandingan tahap ungkapan molekul CD44 semasa pembezaan B dan T normal dan tahap NHL yang berlainan. Mengikut data mereka, ekspresi CD44 bersamaan dengan limfoma dengan risiko yang tinggi pelarut, dan tahap ekspresi molekul ini meningkat dengan perkembangan NHL. M.K. Angelopoulou et al. [5] juga mencirikan profil imunologi ekspresi MA di NHL yang berbeza, menonjolkan CD44 dan CD56 sebagai faktor risiko utama untuk kerosakan CM di NHL.

Oleh itu, terdapat faktor-faktor yang, dalam satu tangan, menyumbang kepada pencegahan NHL, dan sebaliknya, mereka boleh menjadi penghalang bagi sel-sel limfoma untuk memasuki bahan aspirat KM. Di bawah keadaan ini, trepanobioptat CM mungkin satu-satunya subjek CM untuk mengkaji substrat leukemia.

Telah terbukti bahawa dengan frekuensi yang lebih besar sumsum tulang dipengaruhi oleh limfoma sel-B rendah-grade [6], yang menurut klasifikasi WHO mengenai hematopoietik dan tisu limfoid [7], termasuk limfoma dari jenis sel dewasa yang matang:

  • limfoma limfoma kecil / leukemia limfa kronik sel-B;
  • limfoma sel mantel;
  • zon marginal lymphoma nod;
  • extranodal MALT-jenis dan zon marginal limpa;
  • limfoma folikel;
  • lymphoma limfoplasma.

Analisis morfologi

Keberkesanan penyelidikan trepanobioptata sebahagian besarnya bergantung kepada kecukupan biopsi. Yang terakhir, menurut beberapa penyelidik, mestilah dari 2 hingga 3 cm panjang (sekurang-kurangnya tidak kurang dari 1.5 cm) dan mengandungi sekurang-kurangnya 5 atau 6 rongga antara-gully [8, 9]. Ini disebabkan oleh hakikat bahawa selular CM boleh berbeza dalam berlainan antara rongga. Ia tidak boleh dinilai dengan tepat untuk serpihan kecil CM, terutamanya dalam kes-kes di mana bahan tersebut diwakili oleh zon subcortical, i.e. kawasan yang terletak di bawah tulang kortikal. Zon ini biasanya sel kecil, terutama di kalangan orang tua. Di samping itu, lebih banyak rongga antara gully hadir dalam biopsi, semakin tinggi kebarangkalian mengesan lesi fokus CM. Kejayaan penyelidikan trepanobioptata, tidak syak lagi, juga bergantung pada kecukupan semua peringkat pemprosesannya: penetapan, penguraian, pengurasan dan pembuatan bahagian-bahagian histologi. Dalam tahun-tahun kebelakangan ini, percubaan telah dilakukan untuk memperbaiki secara terperinci setiap tahap pemprosesan CM, yang didasarkan terutamanya oleh pengenalan kaedah imunohistokimia yang meluas ke dalam proses diagnostik, khususnya untuk menentukan sifat dan sifat infiltrasi limfoid dalam CM. Sebagai contoh, kaedah telah dicadangkan untuk menuangkan bahan biopsi ke dalam resin methacrylate tanpa penyahkelasan terlebih dahulu [10, 11]. Walau bagaimanapun, pada masa yang sama ditekankan bahawa kaedah ini terlalu mahal dan memakan masa, dan keputusan yang baik, termasuk penyelidikan imunohistokimia, dapat dicapai dengan mematuhi semua peraturan dan keperluan kaedah histologi standard [11].

Petunjuk utama untuk trepanobiopsy KM adalah:

  • limfoma yang disyaki;
  • penubuhan histotype limfoma;
  • penentuan tahap kerosakan tumor pada semua peringkat proses terapeutik dan diagnostik;
  • memantau hasil rawatan untuk mengesan remisi, remisi separa, kambuhan tumor, dll.


Pengesanan infiltrasi limfoid dalam CM tidak sama dengan lesi limfomanya. KM biasanya mengandungi sel limfoid, yang boleh menyumbang sehingga 15-20% daripada keseluruhan populasi sel nucleated KM. Ini adalah sel dewasa dan sel progenitor T dan B limfoid. Antara sel dewasa, T-limfosit lebih banyak, dan sel B-linear menguasai sel-sel progenitor. Sel-sel limfoid boleh terletak di antara interstitially, antara unsur-unsur hemopoiesis, dan boleh dalam bentuk kluster kecil - nodul limfoid. Peningkatan bilangan sel limfoid boleh menjadi mutlak dan relatif kerana pengurangan hematopoiesis, sebagai contoh, dalam keadaan hipoplastik. Nodul limfoid benih boleh didapati di mana-mana KM, walaupun mereka lebih sering dijumpai pada orang tua, wanita, dalam beberapa penyakit hematologi dan bukan hematologi, misalnya, dalam penyakit rheumatoid [8], dalam kes jangkitan sitomegalovirus, toxoplasmosis, mononucleosis berjangkit, dan lain-lain jangkitan, dengan sindrom pasca transfusi [12-14], dan sebagainya.

Empat jenis nodul limfoid jin yang digambarkan [15, 16]: yang pertama - dengan pusat germinal; kedua - dengan sempadan yang jelas; yang ketiga - dengan kontur tidak rata yang tidak rata; yang keempat - dalam bentuk kluster kecil sel limfoid. Sebagai tambahan kepada sel limfoid, mereka biasanya mengandungi sel plasma, histiocytes, kapilari, kadang-kadang eosinofil dan sel mast, serta rangkaian reticulin lembut. Mereka boleh berbilang, terletak, sebagai peraturan, intertrabecular. Pengesanan infiltrasi limfoma yang juga sedikit diketahui dikenal sebagai penunjuk generalisasi tumor dan, oleh karenanya, mungkin penting untuk prognosis dan perancangan terapi [17]. Oleh itu, isu-isu menjelaskan jenis infiltrasi limfoid, diagnosis pembezaan antara infiltrasi limfoid bagi watak jinak dan lymphoma lesi CM adalah sangat penting, tetapi pada masa yang sama salah satu yang paling sukar, dan tidak selalu diselesaikan oleh penyelidikan histologi, tetapi mereka memerlukan penggunaan biologi molekul, genetik imunohistokimia kaedah.

Kriteria histologi utama yang digunakan untuk diagnosis pembeda limfoma CM dan penyusupan limfoid jin, serta untuk limfoma subclassing dalam CM, adalah, pertama, ciri topografi penyusupan limfoid dan, kedua, ciri-ciri morfologi (nuklear-sitoplasma) sel-sel yang menyusup.

Terdapat 3 jenis utama penyetempatan penyusupan tumor limfoid dalam sumsum tulang: interstitial, focal dan difus [8] (Rajah 1).


Rajah. 1. Perwakilan skematik jenis kekalahan KM dalam NHL [8]

Dalam jenis interstisial, sel limfoid terletak di antara sel-sel CM tanpa mengganggu senibina biasa dan hematopoiesis (Rajah 2).


Rajah 2. Lesi jenis interstisial dalam B-CLL. Bau dengan hematoxylin dan eosin, HC. 250

Dengan jenis penyebaran, penyusupan limfoid secara besar-besaran dicatatkan, mengisi semua atau hampir semua ruang interglobe dengan pengurangan yang tajam atau penggantian lengkap tisu adiposa dan hematopoietik. Jenis fokus penyusupan limfoid dicirikan oleh kehadiran foci, yang paling kerap. Foci boleh terletak intertrabecular dan / atau paratrabecular. Paratrabekulyarnaya penyetempatan boleh dalam bentuk pembentukan sel-sel limfoid lebar yang berbeza dan panjang, ketat bersebelahan trabeculae dengan fenomena stromal sclerosis atau perapian berbaring di trabeculae tulang asas yang luas (Gamb. 3).


Rajah. 3 Paratrabekular pertumbuhan penyusupan tumor dalam limfoma folikular. Bau dengan hematoxylin dan eosin, HC. 200

Penyusupan tumor limfoid tumor boleh terletak di bahagian pusat rongga interstitial, iaitu. intertrabecular. Mereka boleh dalam bentuk nodul (Rajah 4) dengan pusat (lebih kerap tanpa ia) pembiakan atau luka dengan sempadan yang tidak teratur dan kurang berkontur.


Rajah. 4. Lesi fokus CM dalam limfoma zon marginal. Bau dengan hematoxylin dan eosin, HC. 200

Lesi besar mungkin bersebelahan dengan jarak dekat ke trabeculae, tetapi jenis lokalisasi fokus limfoma ini bukan paratracular. Variasi jenis penyusupan interstisial ialah penyetempatan intrasinusoidal sel-sel tumor (Rajah 5) [8, 18].


Rajah. 5. Penyetempatan lenokosit tumor dalam intrasinusoidal. Imunohistokimia, pewarna pada CD20

Satu lagi jenis infiltrasi limfoma KM digambarkan - satu penyebaran sel tunggal dengan kehadiran sel-sel limfoma individu di antara unsur-unsur hematopoiesis sebagai jenis interstisial yang dinyatakan dengan min. Terdapat kombinasi pelbagai jenis infiltrasi limfoid yang membentuk jenis bercampur. Sebagai contoh, interstitial-resol, interstitial-nodular, interstitial-intrasinusoidal [8, 11]. Dengan mengambilkira topografi penyusupan limfoma, ciri-ciri morfologi (nuklear sitoplasmik) sel-sel tumor dan kehadiran atau ketiadaan tanda-tanda myelofibrosis di kawasan yang terjejas, satu algoritma telah dibangunkan untuk limfoma subclassifying dalam CM. Kehadiran hanya penyusupan limfoma paratrabekular membolehkan, tanpa sebarang keraguan, untuk bercakap mengenai limfoma folikel. Limfoma folikular juga dicirikan oleh jenis penyusupan campuran, termasuk foci antara bakteria, tetapi dengan kehadiran terpenting dari lokalisasi paratrabekular. Pertumbuhan interstitial sel limfoma sangat jarang berlaku, dan jenis resin hampir tidak dijumpai. Infiltrat terdiri terutamanya daripada sel-sel yang sama dengan centrocytes dari pelbagai saiz, dengan sel-sel tunggal daripada jenis centroblast. Komposisi sel yang dominan dalam CM adalah jenis 1 lymphoma folikular. Selalunya, gambaran limfoma folikel dalam nodus limfa tidak bertepatan dengan komposisi sel dengan gambar yang diperhatikan dalam CM. Fenomena ini dipanggil penangguhan. Ciri ciri limfoma folikular dalam CM adalah myelofibrosis, yang diperhatikan di dalam kawasan kerosakan limfoma tanpa tanda-tanda gangguan seni bina biasa CM.

helah kecil paratrabekulyarnoy penyusupan boleh berlaku pada limfoma sel mantel dan limfoma lymphoplasmacytic, tetapi untuk menolak limfoma, kecil lymphocytic / B-kronik leukemia lymphocytic. Bagi limfoma zon mantel, jenis sel interstitial dan fokus sel pertumbuhan lymphoma adalah tipikal [19]. Yang terakhir adalah campuran sel-sel homogen saiz kecil dan sederhana dengan garis-garis besar membran nuklear. Kadang-kadang sel mempunyai morfologi centrocytoid, yang boleh meningkatkan kesamaan dengan limfoma folikular. Walau bagaimanapun, sel-sel yang besar dengan struktur centroblast atau immunoblast tidak dijumpai. Kehadiran histiocytes dengan sitoplasma cerah tanpa tanda-tanda phagocytosis adalah mungkin. Myelofibrosis tidak ciri. Bagi lymphoma limfoma, interstitial, interstitial dan jenis pertumbuhan sel tumor yang tipikal adalah tipikal. Penyetempatan Paratrabecular berlaku, tetapi sangat jarang [18]. Diagnosis limfoma lymphoplasmocytic berdasarkan lokalisasi infiltrat limfoma sahaja tidak mungkin. Satu peranan penting dimainkan oleh pencirian terperinci struktur sel, yang diwakili oleh jenis sel lymphocytic kecil, plasma dan sel-sel limfoplazmotsitoidnymi, serta sebilangan kecil immunoblast, plazmoblastov. Sering adalah myelofibrosis, tumpuan atau meresap, tanpa mengganggu senibina biasa [14].

Dengan penyusupan jenis interstisial dan / atau meresap dengan atau tanpa formasi foci, pertama sekali, terdapat rasa disyaki limfoma daripada limfosit kecil / leukemia limfosit kronik sel-B. Kehadiran pseudofolliculitis dalam kes-kes pertumbuhan jenis tumor terutamanya meresap, terutama komposisi sel menyusup (sel-sel kecil dengan pusingan nukleus, chromatin lumpy) membenarkan untuk mengesahkan histotype limfoma yang dikatakan itu. Myelofibrosis untuk limfoma daripada limfosit kecil / leukemia limfositik B-kronik tidak tipikal.

Lymphoma zon marjinal limpa, dengan atau tanpa sirkulasi limfosit vaskular, dicirikan oleh penyusupan antara bakteria atau penyebaran sel-sel tumor CM. Penyetempatan sel limfoma di dalam sinus dari sumsum tulang dianggap ciri [20-22]. Jenis penyusupan ini boleh berlaku di dalam jenis limfoma lain [18], tetapi dalam kes-kes penguasaannya, diagnosis limfoma zon marjinal limpa boleh dibuat dengan kebarangkalian yang tinggi. Limfoma zon marginal jenis MALT-nodal dan ekstranodal jarang melibatkan CM, tetapi dalam kes-kes kekalahannya, jenis penyusupan jenis percikan interstisial berlaku. Foci saiz besar mungkin berkaitan dengan trabeculae tulang, beberapa lesi mungkin menyerupai folikel limfoid, mempunyai pusat pembiakan dan zon marginal yang luas yang terdiri daripada sel dengan morfologi monocytoid. Di dalam komposisi sel terdapat sel-sel limfoid saiz kecil dan sederhana dengan nukleus bulat, lebar sederhana cytoplasm terang, serta bilangan sel plasma yang berlainan, sebilangan kecil sel limfoid yang diaktifkan. penjelmaan Peripheral limfoma sel B agresif bukan Hodgkin - meresap limfoma sel besar dan Burkitt Lymphoma - ciri jenis terutamanya meresap pertumbuhan sel-sel tumor dalam BM.

Kekalahan CM dalam limfoma sel T perifer kurang biasa daripada sel B-periferal [23]. Histotip limfoma sel T periferi adalah:

  • tidak ditentukan;
  • angioimmunoblastic;
  • sel besar anaplastik dan limfoma sel T kulit.

Kekerapan lesi KM dalam limfoma sel T perifer sangat berubah-ubah, seperti jenis lymphoma penyetempatan substrat. Ciri-ciri limfoma sel T perifer termasuk keupayaannya menyebabkan perubahan sekunder yang ditandakan dalam bentuk pembiakan vaskular, reaksi granulomatous, eosinophilia, myelofibrosis, dan sebagainya. Salah satu masalah penting dalam mengesahkan lesi KM di limfoma sel T periferi adalah diagnosis pembezaan dengan proliferasi sel T-sel reaktif, yang terdapat dalam penyakit tumor, seperti sel tumor sel-sel kecil, limfoma Hodgkin klasik, kekuasaan limfoid nodular limfoma Hodgkin, myelo-displastic., menyebar limfoma sel B besar, kaya dengan sel T dan / atau histiocytes, dan juga dalam keadaan bukan tumor: penyakit autoimun seperti arthritis rheumatoid dan polymyalgia, beberapa jangkitan virus dan bakteria, dsb. [23].

Tafsiran maklumat histologi tidak selalu mudah, dan diagnosis yang betul berdasarkan peperiksaan histologi sahaja tidak mustahil dalam kebanyakan kes. Kerjasama rapat antara ahli histopatologi dan pakar hematologi, penggunaan kaedah penyelidikan tambahan yang lebih luas, seperti imunophenotyping dan, dalam sesetengah kes, analisis molekul biologi dan genetik diperlukan.

Immunophenotyping

Trepanobioptum CM (silinder osteomedullary) adalah ketumpatan bahan heterogen: komponen tulang adalah bahan padat, tisu hematopoietik adalah bahan separuh cecair yang longgar. Untuk melakukan tindak balas imunologi, adalah perlu untuk menyediakan bahagian ultrathin yang memerlukan membawa semua komponen histologi ke kepadatan yang seragam. Ini boleh dicapai dengan melembutkan struktur tulang, atau dengan memampatkan tisu hematopoietik itu sendiri. Dalam kes pertama, penyahkali tulang dilakukan, kesan kedua dapat diperolehi dengan menuang bahan ke dalam larutan berdasarkan resin methacrylate atau beku pada suhu rendah (hingga -700 ° C) dalam campuran khas, dan kedua-dua kaedah tidak memerlukan proses decalcification [24, 25]. Pembekuan bahan trepanobiopat sangat sesuai untuk mengekalkan penentu antigen, sementara penggunaan resin metacrylate membolehkan mendapatkan persiapan histologi yang sangat baik [10, 11]. Pada masa ini, seperti yang telah dinyatakan, kaedah penyahkaliasinan digunakan secara meluas dalam amalan rutin, diikuti dengan menuangkan bahan ke parafin. Pilihan kaedah berlaku sebagai hasil pemilihan sejarah, dengan mengambil kira kemungkinan ekonomi dan aksesibiliti teknikal.

Terlepas dari protokol histologi yang digunakan untuk mengisi bahan tersebut, pewarnaan imunologi bahan dilakukan berdasarkan satu prinsip, yang berdasarkan reaksi antigen kepentingan - antibodi monoklonal. Jenis penyediaan histologi trepanobiopta hanya boleh menjejaskan jenis pewarna dengan reaksi positif yang boleh dibaca oleh ahli morfologi. Oleh itu, untuk pemotongan cryostat, penggunaan pewarna neon optimum, untuk bahan yang tertanam dalam parafin atau resin metacrylate, kromogen boleh dilihat pada tahap mikroskop cahaya. Evolusi kaedah imunologi untuk mengkaji bahan trepanobioptates CM telah membawa kepada pilihan kaedah immunoenzymatic (immunohistochemistry - IHC) pada bahagian parafin CM sebagai yang utama. Untuk kejelasan, anda boleh membuat perbandingan semua kaedah pewarnaan (lihat jadual).

Jadual Perbandingan pelbagai kaedah pewarnaan bergantung kepada protokol untuk merawat trepanobiopta KM bahan

Di makmal imunologi hemopoiesis Pusat Saintifik Kanser Rusia, semua kaedah yang disampaikan telah diuji. Keutamaan diberikan kepada IHH dalam kombinasi dengan immunofluorescence pada bahagian parafin [26, 27]. Adalah jelas bahawa imunophenotyping trepanobioptates CM adalah proses teknikal yang sukar dan ekonomi yang mahal dan oleh itu memerlukan petunjuk dirumuskan dengan jelas untuk menjalankan.

Secara umum, di NHL, tugas utama imunofenotip CM adalah:

  • pengesanan infiltrasi limfoid neoplastik;
  • diagnosis pembezaan pelbagai limfoma;
  • diagnosis pembezaan dengan proses reaktif.

Keutamaan dalam penyelesaian tugas harus, tentu saja, diberikan kepada cytofluorimetry aliran moden aspirat KM. Tanda-tanda untuk kajian imunohistokimia trepanobioptates KM di NHL adalah lebih sempit. Kajian ini perlu dijalankan:

  • apabila infiltrasi limfoid patologi CM dikesan dan tidak ada kemungkinan cytofluorimetry aliran aspirasi;
  • dalam kes kekurangan sel dalam aspirat atau peratusan yang rendah daripada jumlah limfosit dalam limfoma yang dicirikan oleh kekerapan lesi KM yang tinggi;
  • sebagai sebahagian daripada kajian komprehensif CM dengan variasi CD5-negatif (folikular, semua varian limfoma zon marginal);
  • untuk diagnosis pembezaan plasmacytosis reaktif dan tumor, dengan peratusan rendah sel plasma dalam aspirat;
  • dalam semua kes, jika hanya bahan yang dikesan dalam trepanobioptate KM infiltrasi limfoid yang mencurigakan untuk tumor.

Dalam sel-sel NHL, keutamaan juga harus diberikan kepada QC, kerana coexpression antigen dianggap diagnostik untuk kebanyakan limfoma. Di samping itu, terdapat kesukaran menggunakan antibodi untuk reseptor sel-T, yang menentukan klonetis T-limfosit neoplastik pada bahagian parafin CM. Kajian immunomorphological bersepadu dari trepanobioptate dari semua NHL-linear memerlukan limfoma sel anaplastik besar (ACL), kerana ia dibezakan oleh jenis penyebaran sumsum yang khas - dalam bentuk monodispersion sel individu antara unsur-unsur hematopoiesis, yang hanya dapat ditentukan secara imunohistokimia. Mengikut data dunia, peratusan pencabulan varian ini adalah kira-kira 30, sedangkan kajian aspirat KM, sebagai peraturan, tidak bermaklumat [28-30]. Sebagai contoh, dalam karya A.I. Slugina [31], didedikasikan untuk limfoma sel-sel dalam kanak-kanak, tidak dikesan dalam salah satu aspirat KM dari dua titik kerosakan CM pada salah satu daripada 18 kanak-kanak dengan diagnosis AKL yang ditubuhkan berdasarkan morphoimmunophenotyping lesi nod dan extranodal.

M. Fraga et al. [32] semasa ujian histologi rutin spesimen biopsi, CM mendapati kerosakan pada hanya 17% pesakit, dan semasa pewarnaan imunohistokimia tambahan menggunakan antibodi monoklonal untuk CD30 dan antigen membran epitel (EMA) - dalam 23% pesakit. Dalam semua 42 kes termasuk dalam kerja mereka, terdapat penyebaran elemen tumor tunggal antara sel-sel hematopoietik biasa dan adiposit. Ciri-ciri histologi serupa pencerobohan sumsum tulang AKL juga digambarkan dalam karya Y. Sadahira et al. [16] dan C. Bayle et al. [33].

Bagi B-NHL, nilai diagnostik objektif imunophenotyping spesimen biopsi trephine CM tidak sama untuk varian yang berbeza, oleh itu, keupayaan diagnostik utama kaedah ini boleh lebih jelas dibentangkan mengikut nosologi. Sebagai contoh, leukemia limfosit limfositik / lymphoma limfosit kecil (B-CLL / LML) dan leukemia limfositik berbulu sel selain daripada ciri-ciri immunophenotypic yang ketara mempunyai potensi tinggi untuk leukemization (> 90%), yang dapat dilihat dalam penstabilan lymphocytosis patologi dalam CM aspirate [7, 8, 14]. Kajian imunomorfologi komprehensif aspirat menggunakan PC boleh dipertimbangkan sebagai asas, kerana hanya PC membolehkan penggunaan pelabelan fluorescent dua dan tiga untuk menilai penekanan penanda diagnostik: CD23 dan CD5 dengan B-CLL / LML dan CD103 dan CD25 dengan ON pada permukaan CD19 + limfosit [34, 35].

Keperluan untuk trepanobiopsy dengan gambar leukemik penuh darah periferal dan aspirat CM tidak begitu jelas. Jika beberapa penulis, dalam kesusasteraan tahun-tahun sebelumnya, menuntut nilai prognostik dari pelbagai jenis penyusupan CM dalam B-CLL [36, 37], yang lain, kemudian, menolaknya [38, 39]. Selepas itu, tanda-tanda yang lebih dipercayai mengenai keagresifan biologi tumor telah dikenal pasti, seperti kehadiran hipermutasi somatik dalam gen yang mengekodkan kawasan pembolehubah rantai berat, ungkapan molekul CD38, dan tahap 2 - mikroglobulin [40, 41].

Limfoma sel mantel (LKM)

Kekalahan CM dengan LKM berlaku pada kira-kira 75-80% daripada pesakit [42-48], dan berbeza dengan B-CLL, tahap leukemik darah periferal hanya terdapat pada 50% pesakit. P.L. Cohen et al. [49] menggambarkan peratusan tertinggi (93) kerosakan CM di limfoma zon mantel pada bahan 46 pesakit. Penulis menjelaskan hasil ini dengan mengkaji bahan trepanobiopsy ketat dua hala pada semua pesakit. Kaedah utama untuk menentukan imunophenotype klon leukemik dalam nosologi ini harus dipertimbangkan sebagai PC aspirate, yang membolehkan menentukan antigen CD5 pada limfosit B clonal dan tahap ekspresi molekul CD20. Walau bagaimanapun, kes-kes yang mencukupi telah dikumpulkan untuk limfoma ini dengan profil ekspresi berleluasa penanda imunologi: tanpa ungkapan CD5 dengan ungkapan positif CD23 [50], ungkapan bersama CD5 dan CD23 [51], CD5 dan CD10 [42, 44], CD10 jika tiada CD5 [52] Selain itu, tanda lymphoma utama, mengikut klasifikasi WHO (2001), adalah overlisan Cyclin D1, yang dikaitkan dengan translocation (11; 14), yang mempengaruhi loci gen mengodai rantaian imunoglobulin berat pada kromosom 14 dan bcl- 1 (siklin D1) pada x omosome 11 [53-57]. Adalah dipercayai bahawa kejadian genetik ini memainkan peranan penting dalam patogenesis pembangunan limfoma zon mantel, kerana overlisan Cyclin D1 (pengatur protein kitaran sel) menghalang sel di sempadan peralihan fasa G1? S. Cyclin D1 merujuk kepada protein yang dinyatakan pada membran nuklear, jadi satu-satunya cara untuk menentukan hari ini ialah kaedah imunohistokimia [58] (Rajah 6).


Rajah. Ekspresi nuklear dari Cyclin D1 oleh sel-sel limfoma substrat sumsum tulang dari sel mantel. Immunohistochemistry, SW. 250

Oleh itu, boleh dikatakan bahawa penentuan utama immunophenotype klon leukemik dengan LMC adalah lebih mudah dengan penggunaan PC, tetapi pengenalan akhir diagnosis memerlukan kajian immunohistochemical CM trepanobioptate.

Lymphoma Follicular (FL)

Menurut data statistik, penglibatan QM di PL ditentukan dalam 40-60% daripada kes [59, 60], dan peredaran sel-sel tumor dalam darah periferal ditentukan dalam kurang daripada satu pertiga daripada pesakit [8].

Keterukan perubahan sclerosis dalam QM, ciri-ciri PL, dan mungkin juga profil ungkapan molekul lekatan, selalunya menghalang sel-sel neoplastik daripada masuk ke aspirat [61-63], oleh itu, histologi biopsi boleh dianggap sebagai kaedah utama penyelidikan KM dengan imunophenotype yang dikenali sebagai tumor extramedullary. Kewujudan "standard diagnostik keemasan" dalam PL-paratrabekulyarnogo penyetempatan substrat limfoma dengan komposisi centrocyte-centroblast - membolehkan morfologi untuk menghadkan tahap KM pembelajaran standard tanpa penggunaan imunohistokimia pewarnaan.

Satu kajian immunohistochemical di PL diperlukan untuk menentukan penyusupan sisa minimum CM apabila menilai kesempurnaan remisi [64]. Bagaimanapun, dengan sel B yang minima, penilaian sifatnya sudah melebihi keupayaan IHC dan hanya boleh dilakukan berdasarkan definisi penjelmaan semula klon gen immunoglobulin atau translogsi pathognomonik t (14; 18).

Limfoma marginal (LMZ)

Dalam klasifikasi WHO (2001), 3 jenis limfoma utama yang berasal dari sel-sel zon mantel marjinal folikel limfoid atau galas limfoid periarteriolar dibezakan. Ini adalah LMZ limpa, versi nodal LMZ, serta varian yang berkaitan dengan membran mukus (MALT).

Dalam LMZ limpa, menurut pelbagai sumber, kerosakan CM adalah paling biasa dalam 67-100% kes [65-68], dengan limfoma MALT pada kira-kira 20% [65, 69, 70]. Penglibatan CM dengan versi nodal dianggap casuistry, yang, bagaimanapun, dapat dijelaskan oleh jarang nosologi itu sendiri [12, 71, 72]. Di peringkat imunophenotyping, diagnosis LMZ ditubuhkan lebih mungkin dengan kaedah penghapusan, kerana persatuan penanda imunologi biasa tidak ditakrifkan. Ungkapan antigen pan-B-linear adalah ciri-ciri dalam ketiadaan ekspresi bersama CD5, CD23, dan molekul CD10 [1, 73-77]. Untuk diagnosis pembezaan dalam kumpulan LMZ, ia mungkin berguna untuk mengambil kira beberapa perbezaan dalam ungkapan immunoglobulin permukaan. Oleh itu, untuk LMZ limpa, coexpression IgM +, molekul IgD + adalah ciri, manakala untuk varian nodal, hanya molekul IgM jika tiada IgD- hadir [7, 78]. Dalam makalah ini, saya ingin memberi tumpuan kepada varian LMZ limpa, yang mempunyai tropisme terbesar untuk tisu hematopoietik. Perlu diingatkan bahawa beberapa pesakit dengan LMZ limpa mempunyai masalah objektif dalam splenektomi, oleh itu beban diagnostik sering jatuh pada limfoma leukemik yang tersedia.

Limfositosis patologi aspirat KM di LMZ limpa memungkinkan untuk mengkaji fenotip unsur lymphoma sitometrium dan cytogenetically [8, 79]. Sejak limfoma ini mempunyai tidak cukup imunologi yang biasa dan ciri-ciri Citogenetik (penghapusan kromosom 7 berlaku dalam masa kurang daripada 40% daripada kes-kes, trisomy kromosom 3 - kurang daripada 17%) untuk mengesahkan diagnosis berguna apa-apa maklumat diagnostik tambahan, cth, mengenalpasti jenis tertentu pertumbuhan limfoma dalam trepanobioptate CM (WHO). Untuk limpa LMZ, dua jenis pertumbuhan histologi pathognomonik telah dijelaskan - intrasinusoidal dan nodular [8, 14]. Dalam jenis pertama definisi tumor "lumpur" dalam katil vaskular dalam standard kajian microcircular bahagian trepanobiopatov CM tidak selalu mungkin berwarna - hanya apabila menggunakan mengotorkan immunohistochemical dengan antibodi monoklonal untuk pan-B penanda sel (Rajah 7) [27]..


Rajah. 7. Intrasinusoidal penyetempatan sel-sel tumor "manis" di LMZ limpa. Imunohistokimia, warna CD20, SW. 200

sel patologi berwarna chromogen coklat (DAB), struktur linear terbentuk dalam perjalanan "dibelasah" sinus (microvessels) jenis KM Nodular adalah kekerapan kejadian kedua pada LMZ limpa. Ia dibezakan oleh lokasi pengantara, pemeliharaan pusat pembentukan kuman baki (sifat berubah) dan zonality diucapkan [8, 14, 80]. Berkata persatuan Morfologi mentakrifkan nodul patologi persamaan dengan folikel limfoid reaktif, jadi jelas menjalankan kajian immunohistochemical trepanobioptate CM di nod jenis limfoma penyusupan di LMZ limpa juga diperlukan, dan dalam kajian ini, selain daripada diagnosis pembezaan dengan penjelmaan lain periferal B-sel sel kecil limfoma, termasuk pengecualian sifat reaktif infiltrasi limfoid. Ciri tambahan Lymphoma sifat neoplastic menyusup dianggap pembentukan rangkaian sel-sel dendrit folikel positif CD21, CD23 dan CD35, yang tidak adalah khas untuk menyusup dalam penjelmaan lain, B-NHL dan nodul jet (Gamb. 8) [14, 80, 81].


Rajah. 8. Rangkaian sel dendritik folikular dalam nodul limfoma dengan LISS. Immunohistochemistry, warna pada CD21

Leukemisasi MALT, seperti yang telah dilaporkan, agak jarang berlaku [65, 69, 70]. Walau bagaimanapun, dalam limfoma ini, inframerah limfoid reaktif T-sel yang cukup padat dapat dikesan. Menentukan sifat infiltrat ini dengan pengecualian lesi KM tertentu yang mendasari pementasan yang betul dengan MALT juga mungkin hanya dengan immunophenotyping [82].

Plasma Sel B-NHL

Immunohistokimia trepanobioptate CM muncul luar biasa ujian diagnostik pengkamiran dalam peratusan yang rendah sel plasma dalam aspirat daripada pesakit dengan IM paraproteinemia disyaki peringkat awal multiple myeloma (MM) atau memantau penyakit baki minimum dalam MM dalam pesakit yang dirawat. Gabungan kaedah immunofermental dan immunofluorescent pada bahan trepanobiopaths CM (Rajah 9) [27, 83] boleh dianggap optimum dari segi informativiti. Immunohistochemistry membolehkan anda menentukan nombor, lokasi dan ciri sitologi plasma sel. Penggunaan antibodi berlabel pendarfluor ganda untuk rantai cahaya immunoglobulin? dan? membolehkan anda menentukan sel-sel plasma mono atau poliklonal dalam satu bidang pandangan.


Rajah. 9. plasmacytosis reaktif. dan - pewarna imunohistokimia pada CD138 (syndecan-1); b - imunofluoresen yang diwarnai dengan gabungan antibodi berlabel? (cahaya hijau) /? (cahaya kuning)

Dalam rajah. 9, dan jelas dilihat bahawa sel plasma berwarna dengan kromogen coklat mempunyai penampilan yang matang, mereka kekurangan atypia nuklear dan mereka terletak pericapillary (sepanjang sinus). Semua tanda-tanda yang paling ciri plasmacytosis reaktif. Dalam rajah. 9b - dalam bidang gelap mikroskop neon, nisbah sel plasma yang membawa? - dan - rantai imunoglobulin adalah kira-kira sama (terdapat kekuasaan yang kecil?), I.e. sel-sel tidak clonal. Diagnosis pelbagai myeloma dikecualikan.

Aggressive B-NHL: limfoma sel besar sel-sel B yang tersebar (DL) dan limfoma Burkitt (LB)

Takrifan kerosakan CM dalam varian ini dengan morfologi ciri nampaknya agak mudah dan dalam kes-kes imunofenotip yang dikenali sebagai komponen extramedullari, ia boleh dihadkan hanya oleh kajian morfologi bahan biopsi trephine atau CM aspirate. Kepentingan tertentu ialah kajian infiltrat sel kecil sel-sel cakera yang tidak jelas di CM dengan beberapa B-NHL, khususnya, dengan DL dan LB. Dalam kesusasteraan moden, fenomena situasi histologi yang tidak menentu dengan DLBL dibincangkan agak jarang. Meringkaskan semua bahan sastera yang ada, tiga sebab utama untuk ketidaksesuaian dapat dikenalpasti [17, 84]:

  • transformasi menjadi varian yang lebih agresif (NHL sel besar). Kebanyakan ciri FL dan B-CLL (Sindrom Richter) dan merupakan manifestasi morfologi perkembangan tumor;
  • proses reaktif. Sel kecil menyusup di CM, berbeza dengan DCL extramedullar, mempunyai sifat sel T dengan nisbah yang berbeza dari populasi CD4 + / CD8 +;
  • biclonality sejati. Bersama-sama hidup bersama dua proses limfoproliferatif dengan ciri clonal biologi immunomorfologi dan molekul yang berbeza. Proses perdana sedemikian juga dipanggil komposit.

Dalam kerja-kerja yang dijalankan di makmal imunologi hemopoiesis RCRC RAMS, dalam kajian imunologi sel kecil lymphoid yang menyusup masuk ke dalam pesakit dengan DVCL (20 pesakit), keputusan yang agak menarik diperolehi. Dalam semua kes, inframerah limfoid kelihatan diwakili oleh sel T reaktif. Dalam beberapa kes, kajian imunohistokimia di kalangan komponen T mengenal pasti sel B yang besar dengan tanda-tanda atypia yang jelas, mirip dengan centroblast dan imunoblas, yang dianggap sebagai tanda awal pencerobohan sumsum tulang DCL. Dalam kes-kes ini, gambar imunologi CM sesuai dengan varian DLT yang kaya dengan sel T (Rajah 10), manakala tumor extramedullari pada semua pesakit mempunyai rupa DLBL klasik.


Rajah. 10. IHH penyusupan lymphoid sel kecil selak di CM pesakit dengan DLAN extranodal. a - pewarnaan untuk CD3 (komponen sel T); b - pewarnaan pada CD20 (sel B anaplastik diskret yang besar)

Dengan analisis komprehensif mengenai kursus klinikal kumpulan yang dikaji, ia telah menentukan bahawa kecenderungan pembentukan kelompok sel T terjadi terutamanya pada pesakit dengan penyetelan extranodal primer DLBC. Dalam pesakit dengan bentuk nodal utama dalam CM, satu penyusupan yang tersebar dengan penyejukan yang sama dengan komponen extramedullari DCL telah dikesan, dan komponen reaktif sel T diwakili oleh beberapa sel terpencil (Rajah 11).


Rajah. 11. Kajian immunohistokimia mengenai substrat leukemic KM dalam DCL utama nodal. dan - pewarna pada D20: pertumbuhan meresap tumor struktur sel besar; b - pewarnaan untuk CD3: beberapa sel T yang tersebar. H. 200

Penyusupan limfoma sel kecil yang tidak jelas telah ditemui oleh kami dan di LB - dengan pengotor imunohistokimia trepanobioptate KM, ia juga kelihatan diwakili oleh komponen T-reaktif (Rajah 12). LB pesakit telah berlaku terhadap latar belakang jangkitan HIV, dan penyusupan sel T adalah mungkin struktur sintesis penyakit.


Rajah. 12. Penyusupan limfoid sel kecil CM dalam LB. IHH, pewarnaan pada CD3

Menggunakan contoh keadaan yang tidak menentu, ditunjukkan bahawa imunophenotyping spesimen biopsi trephine CM, sebagai tambahan kepada nilai semata-mata praktikal, boleh menjadi kepentingan penyelidikan. Sebagai contoh, penentuan sifat sel T-sel reaktif terhadap limfoid sel kecil menyusup pada pesakit dengan penyetempatan extranodal primer DLBL mungkin menunjukkan imunogenik yang tinggi dari bentuk limfoma ini berbanding dengan nodal primer. kajian lanjut sub-populasi komponen T-reaktif, serta perbandingan antara dua bentuk DLBCL immunophenotype dengan pelbagai immunogenicity boleh memberi penerangan tentang mekanisme kekebalan antitumor dalam keganasan hematologi dan limfoma secara umum.

IHH, seperti mana-mana kaedah lain, sudah tentu batasannya. Sebagai contoh, bercampur-sel (T dan sel B) nodul limfoid dalam periferal B-NHL sebelum ini tanpa ragu-ragu dilihat sebagai reaktif, tetapi dengan pembangunan kaedah biologi molekul telah menjadi mungkin untuk menilai secara berasingan mengambil komponen B sel. Oleh kerana itu, pelbagai penerbitan mengenai analisis retrospektif biopsi bahan arkib, di mana penulis berhujah sifat klon sel B diasingkan daripada "reaktif" menyusup menggunakan tindak balas rantai polymerase (PCR) [85, 86]. Malah, berbanding dengan immunophenotyping diagnostik molekul, khususnya, PCR adalah lebih tepat, membolehkan untuk menganggarkan bilangan minimum sel limfoid yang menentukan ciri-ciri permohonan - untuk diagnosis penyusupan minimum dengan CM pementasan awal penyakit ini dan untuk memantau pengampunan.

Oleh itu, boleh dikatakan bahawa kajian bahan KM trepanobiopath menggunakan kaedah moden di kebanyakan NHLs adalah ujian yang sangat diperlukan, yang membolehkan mendapatkan maklumat diagnostik tambahan yang penting yang secara kritis dapat mempengaruhi perancangan taktik rawatan. Yang paling penting perlu dipertimbangkan kajian bunyi aspirasi immunomorphological komprehensif dan trepanobioptate KM (menggunakan kaedah untuk HRC aspirasi KM) menubuhkan tumor extramedullary immunophenotype komponen (apabila hadir) [27, 83, 87-90]. Di Makmal Immunologi Hemopoiesis dan Jabatan Anatomi Patologi Penyakit Tumor RAMS dibangunkan pendekatan bersepadu untuk diagnosis, yang terdiri daripada pemeriksaan histologi terperinci substrat utama NHL blok parafin dengan Immunohistokimia terperinci dalam bahan segar (bahagian cryostat), dan penilaian cytochemical Immunomorfologichesky aspirat CM ditambah IHC trepanobioptate [91].

Bahan yang diambil dari jurnal "Oncohematology", №1-2, 2006.